Las bacterias de Nespresso / The Nespresso bacteriome

Hace algo más de un mes se publicó un artículo que ha llegado ya a las pantallas de muchos lectores, algunos medios de comunicación se hacían eco de la noticia, se comentaba en el trabajo pero también en muchas casas. ¡Investigadores de la Universidad de Valencia han encontrado bacterias en el café!

Hoy os hablo de este artículo porque es realmente especial para mí. Ha sido mi tercera publicación científica junto a Cristina Vilanova y Manel Porcar, a quienes desde aquí agradezco enormemente su trabajo y dedicación en este artículo.

Manos a la obra, ¿de qué va el artículo?

Como todos sabéis el café contiene cafeína. En los humanos, la cafeína es un estimulante del sistema nervioso central, pero esta molécula no tiene el mismo efecto sobre los microorganismos, sobre los que actúa principalmente inhibiendo su crecimiento. Así pues se dice que el café o el té tienen propiedades antimicrobianas.

El objetivo de la investigación era comprobar si existen microorganismos capaces de sobrevivir en este ambiente. Se fueron tomando muestras de los depósitos de residuos de varias máquinas Nespresso. Y… voilà! Los resultados que obtuvimos revelaban la existencia de una comunidad bacteriana muy diversa capaz de colonizar rápidamente en el lixiviado.

Máquinas de Nespresso utilizadas y géneros de microorganismos encontrados en ellas.

Ya sabíamos que hay microorganismos capaces de degradar la cafeína (es el caso, por ejemplo, de Aspergillus tamarii, Trichosporon asahii y Pseudomonas sp.), pero nuestros resultados mostraban mucho más que eso. ¡Hasta 67 géneros distintos de bacterias! Esto no significa que todos esos microorganismos sean capaces de degradar la cafeína, simplemente son capaces de tolerar ciertos niveles de “contaminación”. Además estudiamos como evolucionaban las distintas poblaciones en los restos del café durante 2 meses y pudimos comprobar como aparentemente ciertos miroorganismos se adaptaban mejor que otras a las condiciones del medio.

Proporción de microorganismos en el café a lo largo de dos meses.

Finalmente, ¿cuál es la relevancia de estos descubrimientos? Algunas de las bacterias que aparecieron en el café tienen propiedades patogénicas, no obstante no hay porque alarmarse, ya que no están presentes en el café de nuestras tazas. Simplemente hay que saber que es recomendable limpiar con frecuencia estas máquinas y evitar contaminar otras partes de la máquina con los restos de café que se almacenan en el depósito de residuos. Además, de cara al futuro, las comunidades microbianas resistentes a la cafeína que descubrimos representan una herramienta prometedora para limpiar ambientes contaminados por cafeína, o incluso para descafeinar café biológicamente.

Aquí os dejo el enlace al artículo ¡No os lo perdáis!

De derecha a izquierda: Manel Porcar, Cristina Vilanova y Alba Iglesias.

Las bacterias de Nespresso en El Mundo y ABC.

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Just one month ago a cool paper reached the screens of many readers, it appeared in some newspapers, and surprised people spoke about it at work but also in many houses. Researchers at the University of Valencia found bacteria in the coffee!

Today I want to tell you about this article because it is really special for me. It is my third scientific publication with Cristina Vilanova and Manel  Porcar, to whom, from here, I want to thank for their work and dedication in this paper.

So, what is the paper about?

As you all know coffee contains caffeine. In humans, caffeine is a central nervous system stimulant, but this molecule does not have the same effect on microorganisms. In this case, it acts primarily inhibiting their growth. That’s why it is said that coffee or teas have antimicrobial properties.

The objective of the research project was to see if there are organisms capable of surviving in this environment. We took samples from the deposits of waste of different Nespresso machines. And … voilà! The results we obtained revealed the existence of a diverse bacterial communities capable of colonizing rapidly the wasted coffee tray leach.

Nespresso machines used and microorganisms found.

We already knew that there are microorganisms capable of degrading caffeine (for example, Aspergillus tamarii, Trichosporon asahii and Pseudomonas sp.), but our results showed much more than that. Up to 67 different bacterial genera were present in the coffee samples! This does not mean that all these microorganisms can degrade caffeine, it’s just that they can tolerate certain levels of «contamination». We also studied how the different populations evolved in the remaining coffee for 2 months and it was possible to see how certain microorganisms apparently had better chances to adapt to the environmental conditions than others.

Microorganisms present in the coffee tray leach during two months.

Finally, what is the relevance of these findings? Some of the bacteria that have appeared in the coffee have pathogenic properties. Despite this, there is no reason to panic, since they are not present in our coffee cups. You just have to know that it is advisable to clean frequently the machines and avoid contaminating other parts of the machine with the coffee leach stored in the waste tank. In addition, for future research projects, the microbial communities resistant to caffeine found may represent a promising tool for biological coffee decaffeination processes and for environmental caffeine decontamination.

Here you have the link to the paper. Enjoy it!

From right to left: Manel Porcar, Cristina Vilanova and Alba Iglesias.

CBM’s, una herramienta muy versátil / CBM’s, a very versatile tool

En una de nuestras últimas entradas, dedicada a las novedades del verano, os recomendábamos leer un artículo muy interesante sobre las aplicaciones de unos módulos llamados CBM’s (carbohydrate binding moduls). Hoy os explicamos mejor qué son estos módulos y para que se pueden utilizar, ¡tienen más aplicaciones de las que os podéis imaginar!

Los CBM’s son unos módulos o partes específicas de algunas enzimas que han despertado un gran interés por sus múltiples aplicaciones en distintos campos. La función principal de estos módulos es catalizar la unión entre una enzima y sus sustratos correspondientes, es decir, favorecen la asociación entre varias moléculas modificando la velocidad de reacción entre ambas. Los CBM’s se pueden obtener “rompiendo” las enzimas que los contienen (proteólisis), pero hoy en día producir CBM’s recombinantes mediante la tecnología del ADN recombinante es mucho más útil, práctico y sencillo.

Los CBM’s se producen generalmente fusionados con otra molécula que facilita su detección y purificación, pero veamos ya sus aplicaciones.

1. Industria textil. En las fábricas de producción de tejidos o telas de algodón hay un proceso muy importante del cual depende la calidad final del producto, se trata del paso inicial en el que se elimina la cutícula que envuelve las fibras de algodón. Cuando esta fina lámina llamada cutícula no se quita correctamente el tejido presenta problemas para absorber el agua o los tintes. En este caso, los CBM’s se utilizan para monitorizar el rendimiento de este proceso llamado scouring.
2. Producción de papel. El uso de CBM’s permite mejorar el drenaje de la pulpa, reduciendo así los costes del proceso de prensa y secado. Además es posible obtener papel más resistente y repelente al agua cuando se combinan varios CBM’s procedentes de múltiples especies de microorganismos. También se han hecho estudios dirigidos a mejorar la calidad de impresión.
3. Biomedicina y biomateriales. Los CBM’s tienen muchísimas aplicaciones en el campo de la inmunología, donde se pueden utilizar por ejemplo para detectar patógenos. Además, los CBM’s se utilizan para mejorar la adhesión y la proliferación celular en biomateriales fabricados para fines biomédicos, y se han llevado a cabo estudios con otros materiales como nanotubos de carbono y grafeno.
4. Biosensores. Los biosensores son instrumentos que se utilizan para medir distintos parámetros biológicos o químicos, por ejemplo en alimentos, análisis clínicos o monitoreo ambiental. En muchos casos para realizar esta medida se utilizan enzimas cuyas propiedades se pueden mejorar gracias a los CBM’s.
5. Industria alimentaria. Los CBM’s han demostrado ser efectivos en la mejora del valor nutricional de los piensos utilizados para alimentación animal. También se utilizan para modular el crecimiento de cultivos vegetales.
6. Medioambiente. En ocasiones determinar la presencia de un determinado compuesto en la naturaleza puede resultar complicado. Mediante CBM’s es posible detectar contaminantes medioambientales para acabar con ellos (biorremediación), aunque también se han utilizado para estudiar la estructura de la pared celular en plantas u otras superficies cuya composición se basa principalmente en carbohidratos.
7. Biología molecular, investigación. En este caso los CBM’s nos sorprenden otra vez por la infinidad de aplicaciones que han demostrado tener en un laboratorio. Se pueden utilizar para producir, purificar e inmovilizar proteínas recombinantes, para crear microarrays, para estudios de modulación en plantas, en ingeniería de proteínas, o simplemente para inmovilizar o marcar moléculas de interés.

El caso es que el número de aplicaciones biotecnológicas en las que intervienen los CBM’s aumenta cada día. La fusión de CBM’s con toxinas y patógenos podría llevar al desarrollo de muchos nuevos biosensores, y modificar CBM’s para otorgarles actividades antivirales, antibacterianas o antitumorales podría asentar las bases para la producción de nuevos medicamentos.

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In our post about the summer news, we recommended you to read a very interesting paper on the applications of some modules called CBM’s (carbohydrate binding moduls). Today we want to explain you what are these modules and for which purposes they can be used, there is an incredible number of applications!

CBM’s are modules or specific parts of certain enzymes which have attracted a considerable interest because of its many applications in various fields. The main function of these modules is to catalyze the bond between an enzyme and its corresponding substrate, i.e. boost the association of several molecules modifying the speed of reaction between them.  CBM’s can be obtained by «breaking» the enzymes in which they are contained (proteolysis), although today they can be easily produced by the recombinant DNA technology.

CBM’s are generally produced fused with another molecule to facilitate its detection and purification, but let’s have a look to their applications.

1. Textile industry. In factories producing cotton fabrics there is a very important process from which depends the final quality of the product, it is the initial step in which the cuticle that surrounds the cotton fibers is eliminated. When this thin layer called the cuticle is not removed properly the efficiency of water or dyes absorption decreases generating economic losses. In this case, the CBM’s are used to monitor the performance of this process called scouring.
2. Production of paper. The use of CBM’s improves the drainage of the pulp, thus reducing process costs and press drying. It is also possible to obtain more resistant and water repellent paper when several CBM’s from multiple species of microorganisms are combined. There are also studies that report that these modules can be applied to improve print quality.
3. Biomedicine and biomaterials. CBM’s have many applications in the field of immunology, in which they can be used for example to detect pathogens. In addition, CBM’s are used to improve adhesion and cell proliferation in biomaterials manufactured for biomedical purposes, and other studies show promising results with other materials such as carbon nanotubes and graphene.
4. Biosensors. Biosensors are instruments used to measure various biological or chemical parameters, for example in food, environmental monitoring or clinical analysis. In many cases to make this measurement enzymes whose properties can be improved thanks to the CBM’s are used.
5. Food Industry. CBM’s have proven to be effective in improving the nutritional value of feed used for animal feed. They are also used to modulate the growth of crops.
6. Environment. Sometimes the presence of a particular compound in nature can mean important and complicated problems related with its removal. Using CBM’s it is possible to detect environmental pollutants to remove them (bioremediation), although they have also been used to study the structure of the cell wall in plants or other surfaces whose composition is mainly based on carbohydrates.
7. Molecular biology, research. In this case CBM’s give us a pleasant surprise for the many applications that have proven in a laboratory. They can be used to produce, purify and immobilize recombinant proteins, to create microarrays, to study modulation levels in plants, in protein engineering, or simply to immobilize or label molecules of interest.

The fact is that the number of biotechnological applications where the CBM’s can be involved is increasing every day. The design of recombinant fusions of CBMs with pathogens and toxins binders predicts the development of CBM-based biosensors, and artificial CBMs with engineered biological activities (e.g. anti-viral, anti-bacterial, and anti-tumor) may settle the grounds for the production of new drugs.

 

Fuentes/Sources:

Oliveira et al. Recombinant CBM-fusion technology – applications overview.

Shoseyov et al. Carbohydrate Binding Modules: Biochemical Properties and Novel Applications.

Ada Yonath y la Cristalografía de Rayos X / Ada Yonath and X-ray Crystallography

Es posible que a muchos de vosotros el nombre de Ada Yonath no os diga nada, pero este es el nombre de una de las científicas más reconocidas a nivel mundial. Recibió en 2008 Premio Mundial de Ciencias Albert Einstein y en 2009 fue galardonada con el Premio Nobel de Química junto con Venkatraman Ramakrishnan y Thomas A. Steitz por su trabajo sobre la estructura de los ribosomas.

Dr. Ada Yonath

Ada E. Yonath nació en Jerusalén el año 1939. Creció en una familia con pocos recursos, pero eso no le supuso ningún obstáculo para recibir una formación de calidad. Estudió Química, Bioquímica y Biofísica en la Universidad Hebrea de Jerusalén y en 1968 se Doctoró en Cristalografía de Rayos X por el Instituto Weizmann. Realizó estancias post-doctorales en Pennsylvania y el MIT (Massachusetts Institute of Technology), pero acabó volviendo a Israel, donde creó su propio laboratorio de cristalografía. Durante toda su carrera como investigadora mantuvo una estrecha colaboración con el Instituto Max Planck en Alemania.

Durante más de veinte años se dedicó en cuerpo y alma a revelar el misterio que suponían en esa época los ribosomas. Se sabía que los ribosomas son las moléculas encargadas de sintetizar o construir proteínas, en cambio no se conocía su estructura tridimensional, por lo que comprender el proceso en su totalidad era extremadamente complicado.

Los ribosomas son las estructuras celulares encargadas de unir aminoácidos para formar moléculas más complejas, las proteínas. Cada ribosoma está formado por dos subunidades (pequeña y grande) distintas compuestas a su vez por cadenas de ARN y proteínas. La subunidad grande es la encargada de catalizar la creación del enlace peptídico que mantiene unidos los aminoácidos, mientras que la subunidad pequeña controla el correcto emparejamiento de los codones que forman el código genético.

Veamos ahora en que consiste la cristalografía de rayos X.

La cristalografía de rayos X es junto con la resonancia magnética nuclear (RMN) el único método que permite determinar la estructura tridimensional de proteínas con una elevada resolución atómica. Las ventajas de la cristalografía son las siguientes: no existe límite en cuanto al tamaño de las proteínas, las estructuras son muy precisas (el error suele ser de 0.1 Ǻ) y permite determinar implícitamente las distancias entre átomos. No obstante, el mayor problema que presenta es la necesidad de crecer cristales, y alrededor del 50 % de las proteínas no forman cristales. ¿Por qué cristales? Los cristales son necesarios para generar una señal que se pueda detectar. Los rayos X son dispersados por los electrones, por lo que las interacciones son demasiado débiles para detectar cuando provienen de una única molécula, en cambio, los cristales contienen miles de millones de moléculas en exactamente la misma orientación. La dispersión de cada una de estas moléculas da un patrón de difracción que se puede medir.

Cristales de ribosomas 70S de T.thermophilus / Crystals of 70S ribosomes from T. thermophilus. Source: Crystallography and Image Reconstructions of Ribosomes. A. Yonath et al., 1990.

Cristales de la subunidad 50S de H.marismortui / Crystals of the 50S subunit of H.marismortui. Source: Crystallography and Image Reconstructions of Ribosomes. A. Yonath et al., 1990.

Cristales de la subunidad ribosomal 30S de T.thermophilus / Crystals of 30S ribosomal subunits from T.thermophilus. Cryocrystallography of Ribosomal Particles. A. Yonath et al., 1989.

La necesidad de crecer cristales es en muchos casos el factor limitante, por lo que se ensayan cientos de condiciones hasta que se encuentran las más apropiadas. Los dos métodos más comunes son la gota sentada y la gota colgada. El primer paso para obtener los cristales consiste en purificar las proteínas. Para intentar crecer cristales se requieren 1 – 10 mg de proteína pura, a los que se añadirán lentamente reactivos que permitan reducir la solubilidad de la proteína y generar una precipitación controlada de la misma. Si posteriormente se fuerza un incremento paulatino de concentración y se controlan las condiciones normalmente se generan cristales de tamaño adecuado para los experimentos de difracción (entre 0.1 y 0.5 mm).

Métodos de la gota sentada y la gota colgada / The sitting drop and the hanging drop methods

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Maybe many of you do not recognize the name of Ada Yonath, but this is the name of one of the most renowned scientists in the world. She received in 2008 the Albert Einstein World Science Award and in 2009 she was awarded with the Nobel Prize in Chemistry along with Venkatraman Ramakrishnan and Thomas A. Steitz for their work on the structure of ribosomes.

Ada E. Yonath was born in Jerusalem in 1939. She grew up in a family with too low resources, but that did not represent any obstacle for receiving a good quality education. She studied Chemistry, Biochemistry and Biophysics at the Hebrew University of Jerusalem and in 1968 she received her doctorate in X-ray crystallography by the Weizmann Institute. She completed her post-doctoral stays in Pennsylvania and the MIT (Massachusetts Institute of Technology), but ended up returning to Israel, where she created her own laboratory of crystallography. During her career as an investigator she always maintained a close collaboration with the Max Planck Institute in Germany.

For more than twenty years she devoted herself to reveal the mystery of the ribosomes. At that time, it was known that ribosomes were the molecules involved in the proteins synthesis, however their three-dimensional structure was an enigma, and it was totally necessary to understand the entire process.

Ribosomes are the cell structures responsible of joining amino acids to form more complex molecules, proteins. Each ribosome is composed of two subunits (small and large), which at the same time are made of different RNA strands and several proteins. The large subunit is responsible for catalyzing the peptide bond that holds the amino acids together, while the small subunit controls the correct pairing of the codons that form the genetic code.

Let’s talk now about the X-ray crystallography.

The X-ray crystallography is together with the nuclear magnetic resonance (NMR) the only method for determining the three-dimensional structure of proteins with high atomic resolution. Crystallography advantages are: there is no limit on the size of the protein, structure prediction is very accurate (error is normally around 0.1 Å) and allows determining distances between atoms. However, the biggest problem that arises is the need to grow crystals, due to that about 50% of the proteins do not form crystals. Why crystals? The crystals are necessary to generate a signal that can be detected. X-rays are scattered by the electrons, so that the interactions are too weak to detect when they come from a single molecule, however, the crystals contain billions of molecules in exactly the same orientation. The dispersion of each of these molecules gives a diffraction pattern that can be measured.

The need to grow crystals is often the limiting factor, so that hundreds of conditions are tested until they are the most appropriate. The two most common used methods are the sitting drop and the hanging drop. The first step to obtaining crystals is to purify proteins. To try to grow crystals 1 to 10 mg of pure protein are required. After that some reagents that reduce the solubility of the protein and generate a controlled precipitation are slowly added. If subsequently a gradual increase in strength and concentration conditions is controlled adequately sized crystals usually are generated for diffraction experiments (between 0.1 and 0.5 mm).

We recommend you to read her autobiography here / Os recomendamos leer su autobiografía aquí

Here you can find all her scientific papers / Aquí podéis leer todas sus publicaciones científicas

 

Microorganismos amantes del ARTE / Microorganisms in love with art

La relación entre microbiología y arte puede pasar inadvertida para la mayoría de personas pero hoy os explicamos cómo se pueden utilizar distintos microorganismos para limpiar y restaurar obras de arte de una forma rápida, específica, respetuosa con la pintura y no tóxica ni para el restaurador ni para el medio ambiente.

Biomineralización

Una alternativa moderna aplicable a los monumentos históricos es el proceso de biomineralización, y más concretamente la carbonatogénesis bacteriana. La biomineralización inducida puede ayudar en la restauración de grietas de estatuas o murallas, ya que hay bacterias capaces de mineralizar y rellenar estos surcos al alimentarlas con medios de cultivo que contengan sales de calcio en solución. Esta técnica se aplica actualmente en España, Francia e Italia y consiste básicamente en la aplicación de soluciones bacterianas sobre el sustrato lítico para producir microcristales permitiendo la restauración de áreas dañadas. Además utilizando la capacidad natural de muchas bacterias no patógenas para formar carbonato cálcico se puede crear y moldear, un velo protector de calcita en la superficie de la piedra con morteros a base de bacterias. Este tratamiento se lleva a cabo con bacterias de los géneros Bacillus, Pseudomonas y Proteus, que permiten obtener una capa regenerada de unos cuantos micrómetros de espesor por carbonatogénesis.

Recientemente se ha utilizado también Myxococcus, que permite el desarrollo de un mayor grosor de la capa regenerada y una mejor protección y consolidación de las muestras tratadas (Rodríguez-Navarro et al., 2003). El proceso es básicamente el siguiente: las bacterias se cultivan en una solución acuosa, se vaporizan sobre el soporte que se quiere tratar y se las alimenta con líquidos nutritivos. Empiezan entonces a proliferar y a producir carbonato cálcico. Cuando el medio nutritivo se agota las bacterias mueren, dejando endurecida la epidermis tratada. Es un método ecológico, contrario al de las resinas hidrófugas empleadas para impermeabilizar la superficie de la piedra, que se sitúa dentro de los parámetros de la ética actual de conservación-restauración favoreciendo la conservación preventiva.

Bio-limpieza

La aplicación superficial de determinadas suspensiones de bacterias beneficiosas para degradar compuestos orgánicos (pegamentos) puede a veces permitir la restauración de pinturas. La utilización de bacterias con el fin de “limpiar” obras de arte hace también posible la eliminación de las frecuentes incrustaciones negras formadas por sulfato cálcico hidratado y residuos de carbón mediante el uso de una cepa seleccionada de Desulfovibrio desulfuricans (Capitelli et al. 2006). La comparación de esta técnica biológica con la técnica química tradicional de limpieza demuestra que posee mucha más eficacia en la extracción de los sulfatos y que no causa daño a la integridad o al color de la piedra. Una estrategia similar permite, empleando una cepa de Pseudomanas denitrificans, la extracción y solubilización selectiva de las incrustaciones de nitratos (Sorlini y Capitelli 2008).

Finalmente, como curiosidad, nos gustaría contaros que algunas bacterias tienen la capacidad de formar pigmentos sobre obras artísticas. Serratia marcescens es una bacteria heterótrofa que utiliza la materia orgánica como fuente de carbono y nitrógeno. Sus colonias tienen color rojo sangre y pueden verse con facilidad a simple vista. Ahora se sabe que esta bacteria fue la responsable de sucesos aparentemente milagrosos durante la Edad Media como los episodios de esculturas o imágenes de cuadros que parecen llorar sangre.

Colonias de Serratia marcescens

 

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The relationship between art and microbiology may go unnoticed for most people but today we explain how you can use different microorganisms to clean and restore artwork in a fast, specific, paint-respectful and non-toxic way for the restaurateur or for the environment.

Biomineralization

A modern alternative applicable to historical monuments is the process of biomineralization, specifically bacterial carbonatogenesis. Induced biomineralization can help in restoring cracks in walls or statues as there are bacteria able to mineralize and fill these grooves when fed with growth media containing calcium salts in solution. This technique is currently being used in Spain, France and Italy and consists basically in the application of bacterial solutions on lytic surfaces to produce microcrystals allowing the restoration of damaged areas. Moreover using the natural ability of many non-pathogenic bacteria to form calcium carbonate you can create and mould a protective veil of calcite on the surface of the stone with bacteria based mortars. This treatment is carried out with bacteria of the genera Bacillus, Pseudomonas and Proteus, which are able to obtain a layer of few micrometers thick regenerated by carbonatogenesis.

Recently it has also been used Myxococcus, which allows the development of a thicker regenerated layer and better protection and consolidation of the treated samples (Rodriguez-Navarro et al., 2003). The process is basically the following: bacteria are grown in an aqueous solution, then they are vaporized on the support to be treated and they are fed with nutritious liquids. Then they begin to proliferate and produce calcium carbonate. When the nutrient medium is depleted bacteria die, leaving the treated hardened epidermis. It is completely ecological method, contrary to the hydrophobic resins used to seal the surface of the stone, which stood within the parameters of the current ethics of conservation and restoration promoting preventive conservation.

Bio-cleaning

Surface application of certain bacterial suspensions able to degrade organic compounds (glues) can sometimes allow restoration of paintings. The use of bacteria in order to «clean» artwork also makes possible the elimination of incrustations formed by black hydrated calcium sulfate and carbon residues by using a selected strain of Desulfovibrio desulfuricans (Capitelli et al. 2006). The comparison between this biological technique with the traditional chemical cleaning technique has shown that the first one is much more effective in removing sulfates and does not cause harm to the integrity or the color of the stone. A similar strategy allows using a strain of Pseudomonas denitrificans, the selective extraction and solubilization of embedded nitrates (Sorlini and Capitelli 2008).

Finally, as a curiosity, we would like to tell you that some bacteria have the ability to form pigments on artistic works. Serratia marcescens is a heterotrophic bacteria which uses organic matter as a source of carbon and nitrogen. These colonies are red-blood color and can be easily seen with the naked eye. We now know that this bacterium was responsible for apparently miraculous events in the Middle Ages, when some sculptures and images of paintings seemed to cry blood.

If you found this interesting you can find much more information on the following items:

Si os ha parecido interesante podéis encontrar mucha más información en los siguientes artículos:

Los Microorganismos y el Arte. (Gacto M.)

Noticia El Mundo